Introduzione

La presente invenzione consiste in una sequenza polinucleotidica che codifica una molecola in grado di sottoregolare il fattore FOXC₂. Tale molecola determina una potente soppressione dell’espressione della proteina FOXC₂. Il composto può essere considerato una nuova strategia molecolare in grado di inibire lo FOXC₂, un fattore di trascrizione noto per essere coinvolto in molti tumori umani.

Caratteristiche Tecniche

La presente invenzione può essere descritta come una nuova strategia terapeutica a base di acido nucleico.  In un vettore d’espressione eucariotico è stata clonata una sequenza polinucleotidica (SAS) in grado di determinare una risposta d’interferenza con la funzione lncFOXC2. Tale sequenza è stata co-trasfettata con un vettore di espressione contenente FOXC2-GFP in linee cellulari differenti di tumori umani (HeLa, HT29, MG63). I risultati sono riportati nelle Figure 1-3. Cellule HeLa sono state trasfettate con FOXC2-GFP da solo, e con FOXC2-GFP + SAS. La SAS promuove la completa soppressione dell’espressione FOXC2-GFP (Fig. 1, Analisi con immunofluorescenza). Al fine di valutare l’inibizione dell’espressione dello mRNA (RNA messaggero) di FOXC2 in cellule tumorali trasfettate come sopra descritto è stata effettuata una RT-PCR (Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction – Reazione a catena della polimerasi inversa) (Fig. 2). Infine, l’analisi Western Blotting (immunofissazione o immunoblot) ha rivelato che la SAS è in grado di sottoregolare anche l’espressione endogena della proteina FOXC2 (Fig. 3). La SAS è una sequenza polinucleotidica che induce la neutralizzazione di FOXC2.

Possibili Applicazioni

• Osteosarcoma;
• Cancro al seno;
• Cancro al colon.

Vantaggi

• Elevata specificità;
• Efficace sottoregolazione dell’espressione di FOXC2.